细胞免疫荧光步骤是什么
2017-06-16 14:41:40 来源：360常识网
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导语：细胞免疫荧光步骤对大家来说一定是很陌生的，他是一种抗原抗体反应，好像对我们来说他显得很遥远的样子，因为我们并不了解他能做什么，通过
细胞免疫荧光步骤对大家来说一定是很陌生的，他是一种抗原抗体反应，好像对我们来说他显得很遥远的样子，因为我们并不了解他能做什么，通过这种技术可以让我们对抗原或抗体的性质、定位一次来分析出更多的数据。那么细胞免疫荧光步骤是什么呢？
步骤：
1. 细胞一定要贴在玻片上（最好可以放入24孔板），为后面照像打基础。细胞密度适中，大约60-75%满片即可，否则容易脱片。
2. 取出细胞后用4%多聚甲醛固定15分钟，现用现配。（以下各步骤切毋使玻片干燥）
3. PBS冲洗
4. 0.1%Triton作用20分钟
5. PBS冲洗
6. 10%正常血清封闭10分钟
7. 加入一抗，4度孵育过夜（找个小瓶盖将小玻片支起来，抗体就不容易溢出），还要记住“砸片”，就是抗体从较高处落到片子上，以分布均匀。抗体稀释度1：60，较常用！
8. PBS冲洗4次，各5分钟
9加入荧光二抗，室温30分钟。抗体稀释度1：400，较常用！
10. 同8。
11. 90%甘油封片。也很关键阿，多封几次才有体会。
12. 避光保存，或到显微镜下观察。
细胞免疫荧光，这对很多人来说都是第一次听说这个东西，也不知道他对我们会有什么好处与坏处，科学研究就是这样子的，普通老百姓是不会明白其中的道理的，但是这些研究也是确实的在我们的生活中取得了成果，能够让大家过的更加舒适。
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