饮用水中大肠杆菌检测方法是什么
大肠杆菌是比较常见的细菌，对于人体是有害的，常见于我们的饮用水当中，要是长时间的饮用含有大肠杆菌的水的话，对于身体的伤害是很大的。对此，要检查水中的大肠杆菌。那饮用水中大肠杆菌检测方法是什么？这个问题，很多的朋友都很好奇，下面就为大家简单的介绍一下。
饮用水中大肠杆菌检测方法是什么？
1、饮用水中大肠杆菌快速检测方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)水样中微生物的收集及其DNA的提取： 采用灭菌后的滤膜或滤器过滤水样，在装有无菌水的EP管中，洗涤滤膜，离心， 弃上清液，备用;
(2)水样中微生物DNA的提取： A、向EP管中加入TE缓冲液，使之重悬; B、加入SDS和蛋白酶K，混匀，温育45min～1h; C、加入氯仿/异戊醇，混匀，离心，将上清液转入一个新EP管中; D、加入等体积的酚/氯仿/异戊醇，混匀，离心，将上清液转入一个新EP管中; E、加入异丙醇，轻轻混合直到DNA沉淀下来，离心; F、弃上清，沉淀物用乙醇洗涤，晾干; G、将沉淀重溶于TE缓冲液，摇匀; H、用紫外分光光度计测定提取的基因组DNA模板的0D值，计算其DNA浓度，计算方 法为： DNA浓度(μg/μL)=OD值260nm×样品稀释倍数×50/1000 I、将基因组DNA模板做好标记，贮存，备用;
(3)PCR扩增; 反应引物： 上游引物：5’-tgttcagtggcaagagtt-3’ 下游引物：5’-taatcgatatacccgctc-3’ 50μL反应体系： 10×PCR缓冲液5μL Tag酶2U/μL1μL MgCl2(25mM)5μL dNTP(2.5MM)5μL ddH2029μL 上游引物10μM2μL 上游引物10μM2μL 模板DNA1.5μg/μL1μL
(4)产物观察： A、凝胶的准备：先配置琼脂糖溶液，加热，使其充分溶解，再加入溴化乙锭溶液; B、配置TAE电泳液; C、倒胶：将配置好的琼脂糖溶液倒入胶板中，待其凝固后，放入电泳槽中; D、电泳：将扩增好的PCR产物与缓冲液按比例混合，加入到凝胶加样孔中，同时加入 DNA分子量标准，接通电源，设定电压和电流，开始电泳。 E、观察;将扩增产物在紫外光下观察，拍摄图片。
上文就是关于饮用水中大肠杆菌检测方法是什么的介绍，现在大家了解了吧！其实可要我们不喝生水，饮用经过烧开的水，就没有这些问题了。这就是为什么总是提倡大家和凉开水的原因。而且多喝凉开水对身体是很有好处的，无论是男女老少。
